食品安全检验手册

第一章 高效液相色谱法1
第一节 高效液相色谱分析原理1
一、高效液相色谱分析的流程1
二、高效液相色谱的分离过程1
第二节 高效液相色谱仪2
一、高效液相色谱仪的输液系统2
二、高效液相色谱仪的分离系统3
(一）进样器3
(二）色谱柱3
(三)流动相5
三、高效液相色谱仪的检测系统5
(一)检测器5
(二）数据处理器7
第三节 高效液相色谱的类型8
一、吸附色谱8
二、分配色谱8
三、离子交换色谱8
四、凝胶色谱8
(一）凝胶渗透色谱9
(二）凝胶过滤色谱9
第四节 高效液相色谱的有关参数10
一、保留值10
二、分辨率R11
三、柱塔板数N12
第五节 定性定量分析13
一、定性分析13
二、定量分析15
第六节 仪器的维护16
一、泵故障的预防及解决的方法16
(一）泵故障的预防16
(二）泵故障和解决的办法16
二、进样器的故障和解决办法17
三、柱故障和解决办法18
(一）柱的预防性保养18
(二）柱故障与解决的办法18
四、检测器故障和解决方法19
第七节 离子色谱法20
一、概况20
二、高效离子(交换）色谱法21
(一)阴离子交换色谱法21
(二)阳离子交换色谱法22
三、高效离子排斥色谱法23
(一）高效离子排斥色谱法的分离机理23
(二）HPICE中的抑制反应23
四、流动相离子色谱法23
(一）MPIC的分离机理24
(二）MPIC中的抑制反应24
五、离子色谱法的检测方式24
(一）紫外可见光度检测法(包括二极管阵列检测法）25
(二）荧光检测法25
(三）安培检测法25
(四）其他检测方法26
六、离子色谱法的样品前处理26
第八节 高效液相色谱法在食品分析检测上的应用26
一、食品添加剂的检测26
(一）食品中苯甲酸、山梨酸、糖精钠的测定26
(二）食品中对羟基苯甲酸甲酯、丙酯的测定27
(三）食品中脱氢乙酸的测定29
(四）单柱双检测器同时测定食品中甜蜜素、苯甲酸、山梨酸29
(五）食品中乙酰磺胺酸钾、山梨酸、苯甲酸、糖精钠的测定30
(六）饮料中乙酰磺胺酸钾、糖精钠、咖啡因的测定32
(七）食品中合成着色剂的测定33
(八）食品中猹埠懿匪氐牟舛
(九）食品中栀子黄的测定37
(十）食品中抗氧化剂的测定38
(十一）植物油中叔丁基对苯二酚的测定39
(十二）食品中乳酸的测定40
(十三）食品中柠檬酸及其盐类的测定41
(十四）饮料中咖啡因的测定41
(十五）四种人工合成甜味剂(糖精钠、甜蜜素、安赛蜜、甜味素）和柠檬酸的
测定42
(十六）味精中5′肌苷酸二钠和5′鸟苷酸二钠的测定43
(十七)酵母中海藻糖的测定44
(十八）F－、Cl－、NO－３、SO2-4的同时测定45
(十九)消毒副产物ClO－２、ClO－３和BrO－３的同时测定46
二、营养强化剂的测定47
(一）食品中牛磺酸的测定47
(二）食品中维生素A、维生素D、维生素E和维生素K的同时测定49
(三)奶制品中维生素A和维生素E的测定50
(四）维生素B族的测定52
(五）食品中抗坏血酸的含量的测定54
(六）食品中维生素D的测定56
(七）食品中叶酸的测定56
(八）高效液相色谱法测定复合维生素胶囊中叶酸含量58
(九）食品中烟酸的测定59
(十）食品中烟酰胺的测定60
(十一）食品中泛酸的测定61
(十二）食品中氨基酸的测定(ACCQ·Tag法）61
三、保健食品中功能成分的检测65
(一）保健食品中芦荟苷的测定65
(二）保健食品中DHEA的测定65
(三）保健食品中异秦皮定的测定66
(四）HPLC法同时测定保健品中腺苷和虫草素含量67
(五）高效液相同时测定保健食品中两种结构形式洛伐他汀的含量69
(六）HPLC法测定保健品中红景天苷70
(七)绿茶中儿茶素的测定71
(八)水果蔬菜中酚酸的测定72
(九）HPLC测定盐酸氨基葡萄糖74
(十）HPLC测定保健食品中五味子甲素、乙素、醇甲的含量75
(十一）番茄碱的高效液相色谱分析76
(十二）保健食品中免疫球蛋白IgG的测定78
(十三)高效液相色谱法测定蜂胶中的黄酮成分80
(十四）高效液相色谱法测定食品中大豆异黄酮含量80
(十五）保健食品中异麦芽低聚糖、低聚果糖、大豆低聚糖的测定83
(十六）10羟基岐补锵┧岬牟舛
(十七)浆果中花青素的测定86
(十八)保健食品中吡啶甲酸铬的测定87
(十九)保健食品中肉碱的测定88
(二十)保健食品中人参皂苷的测定89
(二十一)保健食品中核苷酸的测定90
(二十二)保健食品中羟脯氨酸的测定91
(二十三)保健食品中金雀异黄素的测定92
(二十四)保健品中槲皮素、山奈素、异鼠李素的测定94
四、农药残留量的测定94
(一)粮、油、菜中西维因的测定94
(二)水果中单甲脒的测定95
(三)大豆及谷物中氟磺胺草醚的测定97
(四)乳品中涕灭威的测定99
(五)乳品中速灭威的测定100
(六)乳品中异丙威的测定100
(七)乳品中呋喃丹威的测定101
五、兽药残留量的测定101
(一）畜禽肉中土霉素、四环素、金霉素的测定101
(二）畜禽肉中氯霉素残留量的测定102
(三）畜禽肌肉中喹乙醇的测定103
(四)鸡肉中二氯二甲吡啶酚的测定105
(五）动物组织中己烯雌酚、呋喃唑酮、磺胺类药物残留测定107
(六)畜禽肉中磺胺类药物残留的检验方法108
（七）阿维菌素类药物的测定110
（八）鸡肉、水产品中四种硝基呋喃类药物的测定112
（九）动物组织中喹诺酮类药物SPEHPLCFLD检测方法114
（十）动物组织中莱克多巴胺的测定117
（十一）高效液相测定虾青素的含量118
六、食品中禁止使用物质的检测120
（一）畜禽肉中地西泮的测定120
（二）动物性食品中克伦特罗残留量的测定121
（三）食品中苏丹红染料的测定122
（四）禽蛋及其制品中苏丹红的测定125
（五)同时测定食品中金橙Ⅱ和苏丹Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ126
（六）食品中激素的测定128
（七）畜禽肉中己烯雌酚的测定129
（八）畜禽肉和水产品中呋喃唑酮的测定130
（九）水产品中的孔雀石绿的测定132
（十）动物性食品中恩诺沙星和环丙沙星残留的测定134
（十一）原料乳与乳制品中三聚氰胺检测方法135
（十二）食品中三聚氰胺残留的测定138
（十三）原料乳中三聚氰胺快速检测139
七、霉菌毒素的测定141
（一）果茶中展青霉素的测定141
（二）烟曲霉震颤素B的测定143
第二章 液相色谱质谱(LCMS/MS)分析技术144
第一节 液质接口的历史发展与现状144
一、传送带接口技术（MBI）145
二、直接液体导入接口(DLI)145
三、流动FAB接口(FFAB)146
四、粒子束接口(PBI）147
五、热喷雾(TSP)147
六、大气压电离(API)148
（一）电喷雾电离技术(ESI)149
（二）化学电离技术(APCI)150
（三）紫外电离技术（UI）152
第二节 大气压电离源的操作优化152
一、ESI源152
（一）电喷雾稳定性喷雾条件152
（二）分析物的特征与选择性153
（三）流动相的选择156
（四）取样锥孔、传输毛细管和干燥气流157
(五）源内碰撞诱导解离（CID）技术157
（六）工作曲线与动态范围157
二、APCI源159
第三节 质谱仪质量分析器159
一、四极杆质谱分析器159
（一）基本原理与马绍方程160
（二）分辨率与灵敏度161
二、离子阱质谱分析器162
(一)共振激发163
（二）离子阱的分析过程164
（三）MSn分析166
三、飞行时间质谱分析器166
四、串联质谱分析器168
第四节 液质联用分析的定性定量技术170
一、定性分析170
（一）保留时间170
（二）同位素丰度比和氮规则170
（三）（准）分子离子峰170
（四）特征裂解171
（五）精确质量测定法173
二、定量分析方法174
（一)外标法174
（二）同位素稀释法174
（三）典型控制软件174
第五节 在食品检测分析中的应用175
一、天然产物分析175
二、天然毒素分析175
三、有机危害物控制179
（一)欧盟控制法规179
（二)食品中违法添加物分析181
第六节 突发公共卫生食品中毒快速分析201
一、瘦肉精中毒的检测201
二、河豚鱼中毒的检测201
三、原料乳及乳制品中三聚氰胺的检测204
第三章 转基因食品的检测208
第一节 转基因食品发展概述208
一、转基因食品的安全问题208
二、正确认识转基因食品的安全性问题210
第二节 转基因食品的检测技术210
一、基于蛋白质水平的检测技术211
（一）酶联免疫吸附法211
（二）试纸法211
（三）蛋白质印迹法212
（四）PCRELISA法212
二、基于核酸水平的检测212
（一）PCR技术212
（二）转基因食品核酸水平检测技术的基础217
（三）DNA提取方法219
（四）提取核酸DNA浓度纯度的测定221
（五）定性PCR检测方法举例222
三、定量PCR223
（一）定量竞争PCR法223
（二）实时荧光定量PCR224
四、转基因食品检测技术的发展趋势227
第三节 PCR技术在测定转基因食品中的应用228
一、方法要点228
二、材料228
第四章 气相色谱法230
第一节 气相色谱分析法原理230
一、色谱中有关术语230
二、塔板理论231
三、速率理论233
第二节 气相色谱仪236
一、气体236
二、填充色谱柱237
第三节 检测器240
一、检测器的性能指标240
二、氢火焰离子化检测器243
三、电子捕获检测器245
四、火焰光度检测器247
五、氮磷检测器248
第四节 色谱分离操作条件的选择249
一、柱温249
二、必要的分析时间tne249
三、汽化室温度249
四、进样量249
五、柱径的选择250
六、柱长250
第五节 定性及定量分析方法250
一、定性分析250
二、定量分析法251
第六节 毛细管柱气相色谱法254
一、毛细管柱气相色谱简介254
二、毛细管柱的选择原则254
三、毛细管柱的进样技术257
四、保留时间问题258
五、毛细管柱的维护与保养260
六、定性与定量261
第七节 气相色谱法在食品分析中的应用262
一、食品中农药残留及环境污染物的测定262
(一)食品中六六六、滴滴涕的测定262
(二)食品中辛硫磷残留量的测定264
(三)粮食中对硫磷残留量的测定265
(四)稻谷中杀螟硫磷残留量的测定266
(五)食品中甲基嘧啶硫磷残留量的测定266
(六)稻米中敌百虫残留量的测定267
(七)食品中甲胺磷和乙酰甲胺磷残留量的测定268
(八)食品中地亚农残留量的测定269
(九)食品中马拉硫磷残留量的测定270
(十)大米中吡氟氯禾灵的残留量测定271
(十一)植物性食品中恶草酮残留量的测定273
（十二）稻米中久效磷残留量的测定273
（十三）食品中倍硫磷残留量的测定274
（十四）食品中甲基异柳磷残留量的测定275
（十五）水果中杀扑磷残留量的测定276
（十六）稻米中稻丰散残留量的测定277
（十七）食品中喹硫磷残留量的测定279
（十八）食品中伏杀磷残留量的测定280
（十九）柑橘中水胺硫磷残留量的测定281
（二十）食品中亚胺硫磷残留量的测定282
（二十一）水果、蔬菜、谷类中有机磷农药多残留量的测定283
（二十二)食品中氟氯菊酯残留量的测定284
(二十三)食品中氯氟氰菊酯残留量的测定286
(二十四)食品中氯氰菊酯残留量的测定287
(二十五)食品中溴氰菊酯残留量的测定288
(二十六)食品中氰戊菊酯残留量的测定290
(二十七)食品中甲氰菊酯残留量的测定291
(二十八)食品中二氯苯醚菊酯残留量的测定292
(二十九)食品中拟除虫菊酯农药多残留量的测定293
(三十)食品中有机氯和拟除虫菊酯类农药多残留量的测定295
(三十一)食品中氨基甲酸酯类农药多残留量的测定296
(三十二)食品中百菌清残留量的测定298
(三十三)大米中杀虫环残留量的测定299
(三十四)大米中杀虫双残留量的测定300
(三十五)稻谷中三环唑残留量的测定301
（三十六)食品中粉锈宁残留量的测定302
（三十七)食品中阿特拉津残留量的测定304
（三十八)粮食中绿麦隆残留量的测定306
（三十九)大米中禾大壮残留量的测定307
（四十)食品中五氯硝基苯残留量的测定308
（四十一)海产食品中多氯联苯的测定310
二、食品添加剂含量的测定311
（一）食品中丁基羟基茴香醚(BHA)、二丁基羟基甲苯(BHT)和叔丁基
对苯二酚(TBHQ)的测定311
（二)食品中环己基氨基磺酸钠的测定312
（三)食品中对羟基苯甲酸酯类的测定方法313
（四）食品中丙酸钠、丙酸钙的测定方法314
（五）食品中脱氢乙酸的测定315
（六）面粉中过氧化苯甲酰含量的测定方法316
三、包装材料检验方法317
（一）苯乙烯及乙苯等挥发成分的测定方法317
（二）氯乙烯单体的测定方法319
（三）乙苯类化合物（以苯乙烯计）的测定方法320
（四）二氟二氯甲烷的测定方法322
（五）二氨基甲苯的测定方法323
（六）样品中残留1，1二氯乙烷的测定324
（七）复合食品包装袋中二氨基甲苯的测定325
（八）聚氯乙烯食品保鲜膜中增塑剂己二酸二(2乙基)己酯(DEHA)含量
测定326
（九）鲜猪肉中邻苯二甲酸二异辛酯含量的气相色谱检测方法327
（十）衍生气相色谱法快速测定食品包装材料中甲醛329
（十一）塑料袋袋装食品中邻苯二甲酸酯的测定331
（十二）食品保鲜膜中己二酸二（2乙基)己酯迁移量的测定332
四、食品中有害物质的检测334
（一）甲醇和高级醇类的测定334
（二）植物油中残留溶剂的检测334
（三）面类制品中的游离甲醛的测定335
（四）谷物中脱氧雪镰刀菌烯醇（DON）和雪腐镰刀菌烯醇（NIV）的测定336
（五）柑橘中富马酸二甲酯（DMF）残留量的测定337
（六）海产食品中甲基汞的测定338
（七）油炸及高温热加工食品中的丙烯酰胺测定339
（八)原料乳及乳制品中三聚氰胺的检测(ＧＣＭＳ和ＧＣＭＳ／ＭＳ)341
五、食品中营养成分的测定345
（一）蜂皇浆及其制品中10羟基岐补锵┧岷康牟舛
（二）保健食品中肌醇含量测定方法346
（三）保健食品中的肌醇和葡萄糖毛细管气相色谱法同时检测347
（四）食品中胆固醇的测定348
（五）保健食品中甘露醇的毛细管气相色谱分析349
（六）保健食品中岐采哟姿狨サ牟舛
（七）衍生气相色谱法同时检测亚油酸、岐惭锹樗帷亚麻酸、AA、EPA、
DHA351
第五章 原子吸收分光光度法355
第一节 原子吸收分析原理及仪器结构性能355
一、原子吸收分析原理355
二、仪器结构及性能356
第二节 仪器最佳条件的选择358
一、火焰原子吸收分析最佳条件的选择358
二、石墨炉原子吸收分析最佳条件的选择360
三、原子吸收分析的干扰及消除361
四、化学基体改进技术362
第三节 仪器的安装调试与鉴定维修363
一、安装调试363
二、仪器的鉴定与验收364
三、仪器的维护与故障检修366
第四节 原子吸收分析方法367
一、直接测定法368
二、间接测定法369
第五节 原子吸收分光光度法在食品分析上的应用369
一、食品中铅的测定369
（一）火焰原子吸收分光光度法369
（二）石墨炉原子吸收分光光度法371
二、食品中镉的测定372
（一）火焰原子吸收分光光度法（碘化钾4甲基戊酮2法）372
（二)火焰原子吸收分光光度法(二硫腙乙酸丁酯法)373
（三)石墨炉原子吸收分光光度法374
三、食品中砷的测定——氢化物发生原子吸收光谱法376
四、食品中汞的测定——冷原子吸收光谱法377
五、食品中铜的测定379
（一)火焰原子吸收分光光度法379
（二)石墨炉原子吸收分光光度法380
六、食品中铝的测定381
（一)火焰原子吸收分光光度法381
（二)石墨炉原子吸收分光光度法382
七、食品中铬的测定——石墨炉原子吸收光谱法383
八、罐装果汁饮料中锡的测定——火焰原子吸收光谱法384
九、食品中镍的测定——石墨炉原子吸收光谱法385
十、食品中锌的测定——火焰原子吸收光谱法387
十一、食品中镁的测定——火焰原子吸收光谱法388
十二、食品中铁的测定——火焰原子吸收光谱法389
十三、食品中锰的测定——火焰原子吸收光谱法390
十四、食品中钙的测定——火焰原子吸收光谱法391
十五、食品中钾、钠的测定——火焰发射光谱法392
十六、食品中锗的测定——石墨炉原子吸收分光光度法393
十七、食品中硒的测定——石墨炉原子吸收光谱法394
十八、食品中硼的测定——石墨炉原子吸收分光光度法395
第六章 氢化物发生原子荧光光谱法397
第一节 概述397
第二节 氢化物发生原子荧光光谱法的原理397
一、原子荧光光谱法的原理397
二、HGAFS法的分析性能与特点398
三、HGAFS分析技术发展简况400
第三节 氢化物发生原子荧光光谱法的仪器装置400
一、激发光源400
二、原子化器401
三、色散系统与非色散系统401
四、检测系统401
第四节 氢化物发生原子荧光光谱法的实验技术与方法401
一、氢化物的发生401
二、HGAFS仪器的参数设置404
三、最佳氢化反应的条件406
四、用HGAFS测定氢化元素的推荐分析条件406
五、提高测定灵敏度、降低检测限的方法407
六、提高测量精密度和准确度的方法408
七、扩大测量范围的方法412
八、HGAFS分析方法的建立412
九、氢化物发生原子荧光光度计的原理及仪器介绍414
第五节 氢化物发生原子荧光光谱法在食品分析中的应用416
一、总论416
二、氢化物发生原子荧光光谱法在食品分析中的应用420
（一）食品中砷的测定420
（二）食品中汞的测定422
（三）食品中铅的测定425
（四）食品中硒的测定426
（五）食品中锡的测定428
（六）食品中锑的测定429
（七）食品中锗的测定431
（八）食品中镉的测定432
（九）食品中铋的测定434
第七章 高效毛细管电泳436
第一节 高效毛细管电泳仪437
第二节 高效毛细管电泳基本原理437
一、电泳力和电泳流437
二、电渗力和电渗流438
三、电渗流的控制439
四、分析参数439
第三节 毛细管区带电泳441
一、操作电压的选择442
二、缓冲液种类的选择442
三、缓冲溶液的添加剂443
四、毛细管电泳柱446
五、温度448
六、毛细管区带电泳操作要点448
第四节 胶束电动毛细管色谱448
一、MECC基本原理449
二、假固定相的类型451
三、影响选择性的因素452
第五节 其他分离模式简介453
一、毛细管凝胶电泳453
二、毛细管等电聚焦453
三、毛细管等速电泳453
四、毛细管电泳联用技术454
五、几种操作方式的比较454
第六节 CE的检测方法和检测器454
一、紫外可见光检测器455
二、荧光检测器455
三、电化学检测法456
四、质谱测定法457
第七节 高效毛细管电泳在食品检测中的应用457
一、芹菜和面包中金属元素的测定457
二、水中无机阳离子的测定458
三、水中无机阴离子及有机酸的测定459
四、食品防腐剂的测定460
五、食品中有机酸的测定461
六、食品中氨基酸的测定462
七、乳清中马尿酸和乳清酸(4羧基尿嘧啶)的测定463
八、单糖测定(衍生化法)464
九、单糖测定(间接紫外法)465
第八章 紫外可见分光光度法467
第一节 紫外可见分光光度法基础467
一、光的性质467
二、物质的颜色468
三、分子能级与吸收光谱468
第二节 吸收光谱特性470
一、电子跃迁的类型470
二、有关术语471
三、吸收带471
四、影响波长位移的因素473
第三节 物质吸收光的定量关系474
一、BeerLambert定律（比尔朗伯定律)474
二、吸收系数475
三、应用BeerLambert定律时应注意的问题475
第四节 紫外可见分光光度计475
一、主要部件476
（一)光源476
（二)单色器476
（三)吸收池477
（四)检测器477
（五)指示器478
二、分光光度计类型478
第五节 定性与定量分析479
一、定性分析479
二、定量分析479
（一)紫外分光光度法定量分析480
（二)可见分光光度法定量分析482
第六节 计算分光光度法484
一、双波长分光光度法484
（一)等吸收点法测定原理485
（二)系数倍率法用于二组分混合液测定时的原理485
（三)系数倍率法用于三组分混合液测定时的原理485
二、三波长分光光度法基本原理487
三、多波长直线回归法488
（一)两组分测定原理488
（二)三组分测定原理489
四、导数分光光度法489
五、正交函数分光光度法491
第七节 紫外可见分光光度法在食品检测上的应用493
一、食用油中游离棉酚的测定方法(紫外法)493
二、食用油中游离棉酚的测定方法(可见分光光度法苯胺法)494
三、食品中总砷的测定方法494
四、蔬菜、水果中甲基托布津、多菌灵的残留测定(三波长法)496
参考文献498