动物生物化学实验教程

目录
第一章 动物生物化学实验常识 1
第一节 生物化学实验技术发展简史 1
第二节 生物化学实验须知 2
一、实验室规则 2
二、实验室安全及防护知识 2
第三节 生物化学实验室基本操作 5
一、器皿的清洗 5
二、移液器的用法 6
三、离心管中液体的混匀 7
第二章 动物生物化学实验常用样品的处理 8
第一节 血液样品的采集 8
一、采血前的准备 8
二、采血部位的确定 8
三、血液采集的注意事项 8
第二节 血清的制备 9
第三节 全血及血浆的制备 9
一、抗凝剂种类 9
二、全血的制备 10
三、血浆的制备 10
四、血液的量取 10
第四节 无蛋白血滤液的制备 11
一、福林-吴宪（Folin-Wu）法（钨酸法） 11
二、氢氧化锌法 11
三、三氯乙酸法 12
第三章 离心技术 13
第一节 离心技术简介 13
一、离心技术基本原理 13
二、离心机的类型和构造 14
三、常用的离心方法 16
四、离心机操作的注意事项 19
第二节 离心技术实验 20
实验一 蛋白质的沉淀反应 20
实验二 动物肝总RNA的分离制备 23
实验三 碱性磷酸酶的分离制备 25
实验四 肝糖原的提取和鉴定 27
实验五 牛奶中酪蛋白的提取 28
第四章 分光光度技术 30
第一节 分光光度技术简介 30
一、光谱与光度 30
二、分光光度法的基本原理 31
三、分光光度计的组成和构造 32
四、分光光度计的使用方法 33
五、分光光度法的计算 35
六、分光光度计的分类 36
七、影响吸光系数的因素 36
八、使用分光光度计的注意事项 36
九、分光光度法的误差和纠正 37
第二节 分光光度技术实验 38
实验一 血糖含量的测定——邻甲苯胺法 38
实验二 直链淀粉和支链淀粉含量的测定——双波长法 40
实验三 纤维素酶活力的测定 41
实验四 蛋白质含量的测定 46
实验五 血清胆固醇的测定——磷硫铁法 52
实验六 紫外分光光度法测定DNA的含量 54
第五章 电泳技术 56
第一节 电泳技术简介 56
一、电泳的基本原理 56
二、影响电泳迁移率的因素 56
三、电泳设备 58
四、电泳技术分类 58
五、常用的电泳方法 59
第二节 电泳技术实验 68
实验一 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质 68
实验二 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血清蛋白质 71
实验三 SDS-PAGE测定蛋白质相对分子质量 73
实验四 DNA的琼脂糖凝胶电泳 76
第六章 层析技术 79
第一节 层析技术简介 79
一、层析技术的基本概念 79
二、层析技术的分类 81
三、几种常用的层析方法 82
第二节 层析技术实验 109
实验一 氨基酸的分离鉴定——纸层析法 109
实验二 离子交换层析分离氨基酸 110
实验三 凝胶层析法分离纯化蛋白质 112
实验四 卵磷脂的提取和鉴定 115
第七章 生物大分子制备技术 117
第一节 生物大分子制备技术简介 117
一、生物材料的选择 119
二、细胞的破碎 119
三、生物大分子的提取 120
四、生物大分子的分离纯化 122
五、样品的保存 128
第二节 生物大分子制备实验 129
实验一 动物组织DNA的提取与定量测定 129
实验二 溶菌酶结晶的制备及活性测定 132
实验三 细胞色素c的提取制备与含量测定 135
实验四 亲和层析纯化血清IgG 138
实验五 蛋白质的盐析和透析 140
参考文献 143
附录 145
附录1 常用缓冲液的配制 145
附录2 常用酸碱指示剂 148
附录3 硫酸铵饱和度计算表 149
附录4 层析法常用数据表及性质 150
附录5 标准溶液的配制和标定 153
附录6 常用实验仪器的使用 154
附录7 生物化学实验常用词中英文对照 158
附录8 生物化学常用网络资源 160